Все частіше в медичній практиці стали застосовувати новий метод діагностики інфекційних захворювань, який має абревіатуру ПЛР. В чому полягає сутність такого методу дослідження і які захворювання можна завдяки йому виявити, а також в чому переваги ПЛР в порівнянні з іншими поширеними способами діагностики і як правильно підготуватися до аналізу, можна дізнатися, прочитавши цю статтю.
Що таке ПЛР?
Абревіатура ПЛР розшифровується як полімеразна ланцюгова реакція. Це можливість ділянки ДНК пропорційно примножуватися при необхідних умовах. Винайдено ПЛР-діагностика інфекцій ще в 1980-х роках. Працювали над відкриттям європейські, американські і радянські вчені, тому визначити первоізобретателя інноваційного діагностичного методу не представляється можливим. Крім того, починаючи з 1983 року, коли був офіційно зареєстрований такий метод дослідження інфекційних захворювань, як ПЛР, продовжується робота щодо удосконалення даного способу. На сьогоднішній день такий метод діагностики застосовують практично в кожній медичній лабораторії, що має сучасне необхідне обладнання.
Як відбувається аналіз?
Для аналізу ПЛР, в залежності від медичних показань, необхідно провести медичний паркан таких матеріалів, як кров, слина, сеча, сперма, грудне молоко або статеві виділення, епітеліальні клітини. Діагностика інфекцій методом ПЛР полягає в тому, щоб виявити ДНК збудника в досліджуваному матеріалі. За допомогою спеціальних лабораторних маніпуляцій з використанням хімічних реактивів і обладнання лаборанти проводять полімеразної ланцюгової реакції. З її допомогою непомітний в мікроскоп ділянку ДНК збудника розростається до помітних в прилад розмірів. Саме тому можна виявити збудника інфекції навіть за наявності незначного ділянки його ДНК в досліджуваному матеріалі.
Які інфекції можна виявити методом ПЛР?
Здатна виявити цілий ряд патогенних мікроорганізмів ПЛР-діагностика інфекцій. Розшифровка результатів зводиться до виявлення збудника і визначення його виду. За допомогою полімеразної ланцюгової реакції діагностують різні захворювання людини: від передаються статевим шляхом до безсимптомних, так званих прихованих інфекцій. За допомогою ПЛР знаходять:
- вірус гепатиту (А, В, С);
- Уреплазма уреалітікум;
- Уреплазма парвум;
- хламидию трахоматис;
- кандиду;
- мікоплазму хомініс;
- мікоплазму геніталіум;
- гарганеллу вагіналіс;
- тріхомоназ;
- мікобактерію туберкульозу;
- вірус герпесу простого 1 і 2 типу;
- вірус папіломи;
- вірус Епшетейна-Барра;
- хелікобактер пілорі;
- вірус імунодефіциту.
Перераховані вище мікроорганізми викликають такі захворювання, як гепатит, туберкульоз, ІПСШ та СНІД.
ПЛР-діагностика інфекцій проводиться у вигляді якісного (тобто визначають наявність або відсутність збудника) і кількісного аналізу (вираховують кількість мікроба в організмі - такий підхід необхідний, наприклад, при діагностиці ВІЛ-інфекцій та гепатиту).
Переваги діагностичного методу
Практично в кожній лабораторії сьогодні проводять діагностику інфекцій людини за допомогою полімеразної ланцюгової реакції. У чому ж переваги такого методу, чому він став неймовірно популярним як серед медиків, так і в середовищі пацієнтів за такий короткий проміжок часу? Пояснюється таке стрімке поширення інноваційної технології високим рівнем достовірності, ефективності та чутливості. Розглянемо докладніше переваги методу діагностики ПЛР:
- Процес проведення аналізу максимально автоматизовано, що виключає людський фактор при проведенні дослідження і розшифровці результату.
- Завдяки сучасним технологіям культури вирощуються протягом 4-6 годин, а відповідно, отримати результат аналізу можна в день здачі матеріалу для дослідження.
- ПЛР-діагностика інфекцій має високу чутливість, що дозволяє виявити збудника навіть при наявності незначного ділянки ДНК. У деяких випадках, наприклад, при уповільнених і безсимптомних захворюваннях, посів культур іншим методом є скрутним або повністю неможливим.
- Матеріалом для дослідження методом ПЛР можуть стати кров, слина, урогенітальні виділення, епітеліальні клітини, сеча, сперма, що вкрай зручно при неможливості взяття для аналізу певного матеріалу. Для діагностики інфекційних захворювань зазвичай використовують венозну кров і урогенітальний мазок.
- Методом полімеразної ланцюгової реакції можна визначити кілька збудників з одного матеріалу. Такий підхід не тільки скорочує час для постанови правильного діагнозу, але і економить витрати на дослідження.
- Метод ПЛР вважається достовірним, так як було відзначено лише невелика кількість помилково негативні результати. Хибнопозитивних відповідей зафіксовано до сьогоднішнього дня не було.
Коли застосовують ПЛР-діагностику?
Якими б перевагами не володіла ПЛР-діагностика інфекцій, застосовують такий метод не завжди. Наприклад, при діагностиці токсоплазмозу полімеразної ланцюгової реакції проводять тільки в тому випадку, якщо аналіз ІФА показав сумнівний або спірне результат. За допомогою методу ПЛР неможливо простежити динаміку захворювання. Відзначимо наступні випадки, коли даний метод дослідження принесе достовірні і ефективні результати:
- для визначення інфекційних захворювань, зазначених вище, у відповідному розділі статті;
- широко поширена ПЛР-діагностика урогенітальних інфекцій;
- для визначення ІПСШ під час вагітності;
- для діагностики ВІЛ;
- при спірних медичних ситуаціях для підтвердження або спростування попереднього діагнозу;
- для визначення батьківства і родинних зв`язків;
- застосовують в генотипуванні для виявлення спадкових схильностей;
- допомагає метод ПЛР працівникам криміналістичного відділу медицини для ідентифікації генетичного матеріалу.
ПЛР під час вагітності
Обстеження ПЛР-методом призначається в обов`язковому порядку вагітній жінці при постановці на облік з метою ранньої діагностики інфекцій, що передаються статевим шляхом. Так як такі захворювання вкрай небезпечні для нормального протікання періоду виношування дитини. ІПСШ провокують завмирання розвиток плода, викидні, внутрішньоутробні каліцтва, мертвонародження, вроджені патології. Своєчасне виявлення і лікування інфекції значно підвищують шанси на успішний результат вагітності і народження здорового малюка.
Зазвичай майбутній мамі призначається комплексне обстеження, яке має назву «ПЛР 6». Таке дослідження включає аналіз на 6 різних інфекцій. Проводиться як в державних, так і в приватних установах ПЛР-діагностика: «Інвітро», «Щаслива сім`я», «Уро-Про» і інші лабораторії пропонують таку послугу. Більш детально це питання описаний нижче.
Таким чином, знадобиться лише один раз провести забір матеріалу для аналізу. При проведенні ПЛР-діагностики під час вагітності необхідний урогенітальний мазок, який береться з каналу шийки матки гінекологічної щіточкою. Така процедура не викликає хворобливих відчуттів у вагітної і ніяк не впливає на плід.
ПЛР для визначення гепатиту
Часто призначають ПЛР-діагностику для виявлення збудника гепатиту. Пояснюється це тим, що таке захворювання нерідко протікає безсимптомно і переходить в хронічну важку важковиліковну стадію. За допомогою ПЛР визначають гепатит на самих ранніх етапах, що сприяє сприятливому лікуванню в максимально короткі терміни. Проводиться в більшості приватних лабораторій така ПЛР-діагностика інфекцій. Ціна залежить від типу визначається вірусу і виду аналізу. Так, просте визначення наявності або відсутності ДНК збудника в крові коштує 400-600 р. Кількісний метод обійдеться в 1200-1500 р.
Комплексне дослідження методом ПЛР
Для ще більш ефективної результативності методу ПЛР в діагностиці інфекційних захворювань широко застосовують комплексне дослідження, яке сприяє скороченню термінів постановки діагнозу і своєчасному лікуванню. Так, лабораторії пропонують аналіз «ПЛР-6» і «ПЛР-12». У перший комплекс входить ПЛР-діагностика статевих інфекцій, таких як:
- уреплазмоз;
- хламідіоз;
- мікоплазмоз;
- папіломавірус людини;
- простий герпес;
- цитомегаловірус.
Таке дослідження часто призначається жінкам на ранніх термінах вагітності, а також в період планування зачаття.
При проведенні «ПЛР-12», крім вищевказаних захворювань, діагностують такі:
- гонорею;
- кандидоз;
- бактеріальний вагіноз;
- трихомоніаз;
- уреплазмоз;
- герпес 1 і 2 типу.
Залежно від лабораторії, перелік досліджуваних захворювань, що входять в комплекс, може відрізнятися. Лікар підбере в кожному конкретному випадку найбільш підходящий варіант обстеження. У будь-якому випадку комплексний аналіз методом ПЛР займе набагато менше часу, сил і матеріальних витрат.
ПЛР-діагностика інфекцій: як здавати?
Підготовка до аналізу методом ПЛР полягає в дотриманні рекомендацій по забору певного виду матеріалу:
- Здаючи урогенітальний мазок, слід утриматися від статевого контакту за три доби до передбачуваного аналізу, припинити прийом антибактеріальних препаратів і місцевих мазей, кремів, свічок, не можна проводити процедуру спринцювання. Під час менструальних виділень забір матеріалу не проводиться - необхідно провести аналіз не раніше, ніж через 3 дні після завершення менструацій. Слід утриматися від сечовипускання за 3 години до аналізу.
- Венозну кров краще здавати з ранку, натщесерце (хоча це не є правилом). Напередодні слід обмежити вживання алкоголю і жирної їжі.
- При здачі сперми необхідно утримуватися від статевого контакту три доби. Рекомендується обмежити вживання спиртного, відвідування сауни, прийом гарячої ванни.
- Сечу слід здавати ранкову, попередньо провівши ретельний туалет статевих органів. Краще збирати матеріал в спеціальну стерильну ємність. Матеріал слід доставити в лабораторію протягом декількох годин.
Як розшифрувати результат?
Не викликає складнощів інтерпретація результатів, після того як була проведена ПЛР-діагностика інфекцій. Розшифровка якісного методу полягає в оцінці наявності або відсутності в досліджуваному матеріалі збудника, а також у визначенні виду патогенного мікроорганізму. Якщо в досліджуваному матеріалі була виявлена ділянка ДНК мікроба, то записується позитивний результат на відповідному бланку, а також вказується, який саме вид мікроба був визначений. При відсутності патогенного мікроорганізму в матеріалі результат буде негативним.
Отримані результати кількісного аналізу, наприклад при діагностиці гепатиту, необхідно розшифровувати за допомогою норм, зазначених лабораторією. Так як одиниці виміру і кількісний фактор значно відрізняються в різних медичних діагностичних установах. Вірогідно, з урахуванням всіх супутніх чинників, розшифрувати такий аналіз може тільки лікар.
Відгуки про лабораторії
На сьогоднішній день практично кожна приватна лабораторія пропонує таку послугу, як ПЛР-діагностика інфекцій.
- «Інвітро» - ціна проведених даної лабораторією досліджень і якість зарекомендували себе не тільки в Росії, але і в Україні, Казахстані, Білорусі. Відгуки пацієнтів свідчать про високу якість надання медичних послуг, швидкому отриманні достовірних результатів. але цінова політика відповідає високій якості. Так, за аналіз методом ПЛР на одну інфекцію, наприклад гепатит, необхідно буде заплатити близько 700 р. За збір матеріалу беруть окрему плату - це ще 400р. Значно дешевше обійдеться комплексне дослідження «ПЛР-6» в даній лабораторії - такий аналіз коштує 1445 р., В нього входять дослідження шести інфекцій, що передаються статевим шляхом.
- Лабораторія «Хеликс» також заслуговує гідні відгуки споживачів. Сучасні технології та обладнання, висококваліфікований персонал і помірні ціни заслужили схвальні відгуки. Вартість аналізу на одну інфекцію методом ПЛР становить 290 р., Додатково потрібно оплатити забір матеріалу. Залежно від його виду такий платіж складе від 25 р. (Сеча) до 550 р. (Урогенітальний мазок з секретом простати).
- Лабораторія «СітіЛаб» відрізняється тим, що виконує практично будь-який аналіз методом ПЛР протягом доби, в той час як інші надають готовий результат тільки через 2 дня. Заплативши трохи більше, можна отримати відповідь навіть у день здачі аналізу. Цінова категорія приблизно наступна: аналіз на визначення хламідій коштує 230 р., «ПЛР-6» обійдеться в 1430 р., А кількісний аналіз гепатиту С - 12650 р. Варто відзначити, що в даній лабораторії представлений широкий вибір комплексних аналізів методом ПЛР. Це є безперечною гідністю при діагностиці захворювань.
Проводиться ПЛР-діагностика і в державній поліклініці на платній основі. Слід зазначити, що вартість таких аналізів незначно нижче в порівнянні з дослідженнями в приватній лабораторії. А ось обладнання та матеріали значно відрізняються - за цим критерієм приватні клініки явно виграють. Проконсультуйтеся з лікарем з приводу вибору лабораторії для здачі аналізу методом ПЛР у вашому регіоні.
